Unsere Produkte:
Kinasen und Substrate
Kinasen phosphorylieren Moleküle, die komplexe zelluläre Prozesse wie Wachstum, Proliferation, Differenzierung, Motilität und Apoptose steuern. Unter pathologischen Bedingungen kann die Kinaseaktivität dysreguliert werden, und die Störung der von diesen Enzymen gesteuerten intrazellulären Signalnetzwerke führt zu vielen Krankheiten wie Entzündungen und Krebs. Infolgedessen sind Kinase-Inhibitoren, die die Wirkung pathologisch dysregulierter Kinasen blockieren, zu einem wichtigen Ziel für die Arzneimittelforschung geworden.
Rekombinante Proteinkinasen werden für die Identifizierung und Charakterisierung von Kinaseinhibitoren verwendet. In Zusammenarbeit mit Carna Biosciences bieten wir mehr als 300 aktive rekombinante humane Protein- und Lipidkinasen an, die sich sehr gut für Aktivitätsuntersuchungen eignen. Zusätzlich stellen wir biotinylierte Kinasen her, die besonders gut für Bindungsstudien eingesetzt werden können, sowie eine begrenzte Anzahl inaktiver oder mutierter Kinasen, die sich Substrate als eignen. Außerdem weitere rekombinante Proteinsubstrate.
Kinasen
Verfügbar sind verschiedene rekombinante humane Wildtyp-Kinasen und mutierte Formen, Isoformen oder inaktive Formen. Alle Produkte werden von der Genklonierung über die Expression bis zur Reinigung vollständig von uns entwickelt und hergestellt. Die Qualitätskontrolle umfasst die Bestätigung der Aminosäuresequenz durch Peptide Mass Fingerprinting, die Überprüfung der Reinheit durch SDS-PAGE, die Konzentrationsbestimmung nach Bradford und die Aktivitätsbestimmung mit Substraten aus Carnas umfangreicher Substratbibliothek.
Zur Aktivierung der Kinasen verwenden wir verschiedene Methoden,die wir über die Jahre perfektioniert haben. Dazu gehören die Koexpression mit einer vorgeschalteten Kinase, die ATP-Behandlung, die Dephosphorylierung oder die Entfernung des Tags. Alle Produkte sind in verschiedenen Größen ab 5μg bis hin zur Massenproduktion erhältlich und werden mit einem chargenspezifischen Datenblatt geliefert.
Weitere Merkmale unserer Kinasen sind: keine Lag-Phase-Aktivität, meist GST-markiert, erhältlich von 5 µg bis hin zu Bulk-Mengen, und eine hohe reporoduzierbarkeit von Charge zu Charge.
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Wir bieten kundenspezifische Produktionen für jede Kinase von Interesse an. Kontaktieren Sie uns einfach für weitere Informationen.
Biotinylierte Kinasen
Neben GST-markierten (teilweise HIS- und anderen markierten) Produkten steht eine breite Palette biotinylierter Kinasen zur Verfügung, die mit einem einzigen Biotin am N-Terminus markiert sind und eine garantierte Reinheit von über 80 % aufweisen.
Die Immobilisierung von Zielproteinen auf Sensoroberflächen unter Beibehaltung von Struktur und Aktivität war bisher problematisch und einschränkend für die Gewinnung aussagekräftiger Daten über Oberflächenplasmonenresonanz (SPR), BioLayer Interferometrie (BLI) oder andere Biotin-Streptavidin-Interaktionstests bei der Entdeckung kleiner Moleküle.
Während der Expression wird Biotin in vivo hinzugefügt. Die Kinasedomäne wird nicht beeinträchtigt und behält ihre Aktivität und Struktur bei, ein klarer Vorteil gegenüber der chemischen Biotinylierung. Die geringere Interferenzrate mit zellulären Proteinen führt zu einer schnellen Erfassung zuverlässiger Daten mit hoher Empfindlichkeit und geringem Hintergrund. Unsere biotinylierten Proteinkinasen lassen sich leicht auf Sensoroberflächen mobilisieren, ohne ihre Struktur und Aktivität zu beeinträchtigen.
Die Aminosäuresequenzen werden durch Peptid-Massen-Fingerprinting bestätigt. Eine Reinheit von mehr als 80 % wird garantiert und mittels CBB-Färbung getestet.
Kinase Substrate
Die Proteinsubstrate von Carna eignen sich für Tests zur Bestimmung der Kinaseaktivität. Alle Substrate werden von der Genklonierung über die Expression in E.Coli bis hin zur Reinigung vollständig im eigenen Haus entwickelt und hergestellt und unterliegen einer strengen Qualitätskontrolle. Jedes Substrat ist in verschiedenen Größen erhältlich, einschließlich der Massenproduktion, und wird mit einem chargenspezifischen Datenblatt geliefert.
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